О нас
Услуги
СМИ о нас
Наши публикации
Испытательный лабораторный центр
Орган инспекции
Лицензии, аттестаты
Бланки заявлений
Информация

 

Схема проезда
Вакансии
Контакты

 

   Филиал ФГУЗ ЦЕНТР ГИГИЕНЫ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ В ГОРОДЕ МОСКВЕ В ЦЕНТРАЛЬНОМ АДМИНИСТРАТИВНОМ ОКРУГЕ

МЕТОД ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА В ИССЛЕДОВАНИЯХ НА ОБНАРУЖЕНИЕ МАРКЕРОВ ПАРЕНТЕРАЛЬНЫХ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ

О.А. Груздева, С.Ф. Астафьева -заслуженный врач РФ., И.И. Пильч,
Т.Э. Ходакова, З.И. Лютых

Филиал ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве"
в Центральном АО г. Москвы

Научные достижения в области изучения антигенной структуры вирусов - возбудителей парентеральных гепатитов человека - позволили широко применять в лабораторной практике метод иммуноферментного анализа (1, 2, 3, 4).

Филиал ФГУЗ "ЦГиЭ в г. Москве" в ЦАО продолжает свою деятельность, используя ранее накопленный опыт и развивая новые направления исследований. Микробиологическая лаборатория филиала, имеющая в своем составе вирусологическое отделение, оснащена современным оборудованием. Вирусологические исследования в филиале проводятся с целью диагностики заболеваний, обследования контактных лиц, исследования напряженности иммунитета, с профилактической целью.

Отделение вирусологии микробиологической лаборатории филиала проводит иммуноферментный анализ на выявление маркеров гепатита "В": HBsAg, a-HBs, HBeAg, a-HBc IgM, a-HBc IgG, a-HBe. Ежегодно только на определение поверхностного антигена гепатита "В" (HBsAg) проводится от 14000 до 20000 исследований. Процент положительных от общего числа обследованных лиц находится примерно на одном уровне (от 1,9% до 2,2%). У детей процент положительных лиц невысокий: 2005 - 0,4%; 2006 - 0,9%; у взрослых - 2,3% и 2,5% соответственно.

Количество лиц, обследованных с целью диагностики заболевания, и контактировавших с больными, значительно меньше. Так, в 2003 году с диагностической целью обследовано 435 человек (в т.ч. 12 детей); контактных - 105. Процент положительных результатов среди диагностических анализов составил у взрослых 25%, у детей - 33%. В 2006 году с диагностической целью обследовано 372 человека (22% положительных результатов), по контакту - 59 (положительных не было).

В связи с массовой иммунизацией населения против вирусного гепатита "В" стали плановыми исследования на определение напряженности иммунитета к возбудителю данного вида инфекции. Число лиц с позитивными результатами обследования на a-HBs ежегодно увеличивается: в 2002 году - 30%, в 2004 - 71%, в 2006 - 83%. Таким образом, иммунная прослойка среди населения к вирусному гепатиту "В" увеличивается.

С 1995 года в лаборатории проводятся исследования крови на наличие маркеров вирусного гепатита "С". Как и в случае с гепатитом "В", количество исследований, проводимых на гепатит "С" (определение антител), доходит до 20000 ежегодно. За последние годы изменяется контингент обследуемых лиц на гепатит "С" - увеличивается число анализов от детей.

Процент положительных результатов (обнаружены антитела a-HCV в реакции ИФА) среди всех обследованных из года в год остается на одном уровне (4,7% - 5,2%). Среди взрослых он составил в среднем 5%, среди детей - 4%. Очевидно диагностическое значение данного лабораторного метода - в группе лиц, обследованных с диагностической целью (2245 чел.), положительный результат выявлен в 53% случаев, а в группе обследованных с профилактической целью (73281 чел.) - в 3,5%.

С целью повышения достоверности и подтверждения результатов а-HCV скрининга, с 2002 года с отделении вирусологии проводится спектральный анализ антител к различным белкам гепатита "С" (core-Ag, NS3, NS4, NS5), идентифицируя антитела класса IgM, IgG - на основании приказа МЗ РФ № 322 от 21.10.2002 "О применении в практике здравоохранения иммуноферментных тест-систем для выявления поверхностного антигена вируса гепатита "В" (HВsAg) и антител к вирусу гепатита "С" (анти - ВГС) в сыворотке крови человека". Данные виды исследований дают возможность провести не только дифференциальную диагностику, но и в какой-то степени оценить тяжесть течения и прогноз заболевания. Известно, например, что первыми в течение острого инфекционного процесса появляются антитела к core-Ag и NS3-Ag (4). За 5 лет в лаборатории филиала исследовано 1174 сыворотки крови в реакции определения антител к белкам гепатита "С", что позволило увеличить число положительных (диагностических) результатов, повысить точность выдаваемых ответов.

В ряде случаев у лиц с клиническим проявлениями инфекции, но сомнительными (низкими) титрами антител, при исследовании сывороток крови в реакции идентификации спектра антител были получены результаты, позволяющие диагностировать инфекцию. При обследовании 188 человек в 18% случаев получен положительный результат.

Однако и после исследований в спектральном анализе остаются сыворотки, которые дают "неопределенный" результат. Было выявлено 23 человека с антителами только к NS3-Ag (2%), 39 - c антителами только к NS4-Ag (3%), и 2 - только к NS5-Ag (0,2%). Как правило, лица с такими сыворотками, по сведениям врачей-инфекционистов, не имели выраженных клинических проявлений.

Для выхода из сложных ситуаций на рынке диагностических препаратов предлагаются новые тест-системы. Лаборатории ИЛЦ филиала внедряют в свою номенклатуру различные виды исследований. С 2006 года отделение вирусологии проводит исследования на определение авидности антител к вирусу гепатита "С". Авидность показывает степень прочности связывания молекулы антител с молекулой антигена. Выявление в сыворотке антител с низким индексом авидности указывает на первичную инфекцию. В настоящее время лаборатория филиала накапливает материал по данной теме.

Наряду с отмеченными аспектами применения метода иммуноферментного анализа в области инфекционной гепатологии, необходимо обратить внимание на перспективность его использования в постоянном сероэпидемиологическом контроле населения с целью выявления лиц (в т.ч. детей от матерей-носителей вирусов гепатитов "В" и "С"), представляющих группу риска по возможному развитию в дальнейшем тяжелых заболеваний (хронический гепатит, цирроз печени, гепатокарцинома и др.).

Заключение. Опыт работы отделения вирусологии филиала ФГУЗ "ЦгиЭ в г. Москве" в ЦАО убеждает в том, что метод иммуноферментного анализа на маркеры вирусных гепатитов "В" и "С", включая спектральный анализ на определение антител к белкам гепатита "С", является эффективным методом лабораторной диагностики парентеральных вирусных гепатитов человека.

Метод ИФА продолжает широко применяться для определения напряженности иммунитета к вирусному гепатиту "В" с целью эпидемиологического надзора за инфекцией среди населения Центрального округа Москвы.


Груздева Ольга Александровна
Астафьева Светлана Фроловна
Пильч Инна Иосифовна
Ходакова Татьяна Элионоровна
Лютых Зинаида Ивановна


    Список литературы:
  1. Аммосов А.Д. "Гепатит В", Институт средств медицинской диагностики ЗАО "Вектор-Бест", Кольцово, 2005.
  2. Николаева Л.И. "Титры вирусспецифических антител в разные фазы инфекции вирусом гепатита С".// Дайджест "Вирусные гепатиты", Вектор Бест, 2003. С. 34-37.
  3. Соринсон С.Н. "Вирусные гепатиты", Теза, Санкт-Петербург, 1997.
  4. Ястребова О.Н. "К вопросу о диагностике гепатита С".// Дайджест "Вирусные гепатиты", Вектор Бест, 2003. С. 29.

 

Напишите нам письмо "fguzmoscao@mail.ru"